卫生部给派遣到苏国的几个工作人员做了指示:既然米国人用的是灭活苗,那我们就用活苗,让他们向苏国医疗、科研机构学习活苗的生产方法。
可是。
以当时的条件,活苗是有一定风险的,致病的可能性很强,并不是特别的安全,苏国人对脊髓灰质炎病毒活苗的研究有限,研究人员只能待在苏国慢慢收集这方面的知识。
时任卫生部生物研究所所长的汤飞凡提出要自力更生研究疫苗。
汤飞凡是国内第一代微生物学、病毒学、免疫学专家,抗战时在米国的帮助下研制生产过青霉素、曾经为扑灭鼠疫做出过贡献,还是沙眼衣原体的发现者之一,被称为华夏疫苗之父。 他也是倾向于制造脊髓灰质炎病毒灭活苗的。
若是完全用自己的技术生产疫苗,可以避开米国人的专利。
灭活疫苗要先对病毒或细菌进行培养,然后用加热或化学剂将其灭活。
灭活疫苗即可由整个病毒或细菌组成,也可由它们的裂解片段组成为裂解疫苗。
加热或者使用福尔马林溶液都可以使疫苗灭活,不过还有一个问题,那就是无论是制造灭活苗或者是活苗都需要胰酶。
国内不能生产胰酶,必须要从国外进口。
苏国报出的胰酶价格相当的昂贵,若是从苏国进口胰酶,疫苗的生产成本要提高不少,如果说疫苗生产有利润,大部分的利润都要被苏国人拿走。
胰酶是一种助消化酶,主要含胰蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶等,胰蛋白酶能使蛋白转化为蛋白胨,胰淀粉酶使淀粉转化为糊精与糖,胰脂肪酶则使脂肪分解为甘油和脂肪酸。
在中性或弱碱性条件下活性较强。
在肠液中消化淀粉、蛋白质及脂肪,从而起到促进消化和增进食欲的作用。
胰酶主要用于疫苗生产中细胞培养时的细胞解离。
贴壁依赖型动物细胞在培养时都是贴附于固相表面进行生长,一般贴附于培养器皿表面或微载体,医学上称之为贴壁培养。
细胞贴壁后迅速铺展并以有丝分裂的方式进行增殖,并很快进入对数生长期。数天后就铺满培养表面,并在形成致密的单层细胞后停止增殖,随后进行放大传代培养,此时就需要使用细胞消化液对贴壁细胞进行处理,使之成为单个细胞并且不对其造成损伤,其中酶类细胞消化液主要成分为蛋白水解酶和缓冲保护溶液。
胰蛋白酶能够水解细胞间的沾粘蛋白,释放出单个独立细胞,并且很好的保持细胞的完整性和细胞活性。
此外。
胰酶还可以用于裂解疫苗。
因为疫苗并不着急使用,生物研究所和卫生部都支持国内自己研制胰酶的制取方法。
他们先后向各个有试验条件的试验室做出了协助科研的请求。
六院也是有实验室的,当然也收到了类似的请求。
院长专门找到李平安,让他在没有手术的时候到实验室研究胰酶的制备。
关于胰酶的制备。
李平安是很清楚的。
在后世。
这已经成了医学、微生物学等学科学生要进行的微生物试验之一,而且需要的原料也不复杂,很容易制备。
李平安自然是愿意接受这个任务的。
他和冉倩打了招呼就去大栅栏那边找了表哥徐海,和屠宰场的其他工作人员打了招呼,说是要用一些猪的胰脏做实验。
屠宰场的工作人员自然是同意的,他们很是配合,还特地让徐海弄了一个刚宰杀的猪胰脏送给李平安。
徐海更是热情。
他还想带着猪胰脏到六院实验室帮着李平安做进一步的处理。
“多谢1李平安说道:“我自己就可以处理,不麻烦你了1
徐海被拒绝之后还有些失望,对李平安说道:“那我就不过去了,回去帮我给姑姑问好1
李平安点点头带着胰脏离开。
骑着自行车从大栅栏回到六院也不过是用了十几分钟而已。
进入实验室,李平安开始制取胰酶。
取猪胰脏,除去脂肪和结缔组织,切碎,称重约50g,加入5倍体积预冷的ph2.5乙酸酸化水,捣碎离心10000 rpm,15 min用4层纱布过滤得到上清液。
将研细的固体无水氯化钙慢慢加入酶原溶液中,边加边搅拌均匀,使溶液中最终含有0.1 mol/l cacl,加入极少量猪胰蛋白酶(约2-5mg),轻轻搅拌均匀。
用5 mol/l naoh调ph为 8.0,活化4~6小时。
活化完成后,用2.5 mol/l hso调ph至2.5~3.0
量取体积,加入固体硫酸铵达到75%饱和度,静置过夜。
离心10000 rpm,15 min。
沉淀为粗胰酶。
活化的时候要求的温度较高,一般为二十五度左右,李平安将试管用棉袄裹着带到家里厨房,火池和地炉都开着,温度差不多到了二十多度。
得到的粗胰酶经过透析纯化以后就能得到可以在疫苗生产当中使用的胰酶。
这个时代条件有限,要是再后世还能使用离子交换的方法得到纯度更高的胰酶。
忙活了两三天才得到一点儿胰酶。
李平安带着胰酶到了院长办公室,本来他是要将胰酶交给院长让他去转交给上级的,不过他只是拿着试管看了看就让李平安自己去卫生部生物研究所。
李平安可不知道卫生部生物研究所究竟在什么地方,他也没有多问,而是去了中科院的药物研究所。
巧的很。
孔伯华正好在药物研究所,他是卫生部聘请的顾问,对生物研究所自然是熟悉的,李平安将试管交给他并且详细叙述了胰酶的制备方法,又说道:“我不知道自己弄的这点儿胰酶在纯度、活性方面是不是能够满足疫苗生产要求,伱将胰酶带回去检测吧1
孔伯华不敢怠慢。
他知道想要保证胰酶活性对温度等条件是有严格要求的,立即就拿着胰酶去了微生物研究所。
刘御医见李平安过来很高兴。
他询问了姜山的近况,又和李平安讨论了一些中医特别是脉学上的问题,说是讨论,其实就是传授给他一些只是而已。
李平安觉得这些知识很有用,听的也很仔细。
大概三四个小时以后李平安才离开回医院。
医大那边的几个医学实验室也接到了卫生部微生物研究所要求协同研究胰酶制备技术的请求。
楚山等人的实验小组正在做别的试验,腾不出手,也就没有回应。
刘怀功和许香夫妇两个却是像热锅上的蚂蚁一般急的团团转。
这个时候他们的实验室正在研究李平安给的速效救心丸药方,不过越是研究就越是觉得复杂,每过一段时间就有一个小突破,眼见胜利就在眼前,可是结果还是达不到预期,距离快速发挥出药效还差的远。
而且。
他们已经知道药物研究所那边也在研究这个药方,对方已经得到了李平安的全力支持,药方是李平安提供的,他可能知道的东西比自己要多的多,还有刘御医一些中医、中药方面的专家加持,进展肯定比自己这边要快的多。
刘怀功夫妻两个担心到最后药物研究所那边还是要比自己这边先拿出研究成果,到时候可是竹篮打水一场空了。
不出或者晚出实验成果,功劳可是那边的。
名誉、地位,他们怕是一点儿都得不到,整一个陪跑,要是拖上三五年不出成果,刘怀功这个实验小组八成是要废了,就算是还能保住教授的头衔怕是也要沦为专业领域内的笑柄,到时候人家都会嘲笑他为了一个不知道从哪里听来的方子浪费了好几年的时间,他究竟是什么眼光,连真假都听不出来?
刘怀功悄悄的和妻子商量:“要不,要不咱们就算了,趁着这个时候咱们实验室见好就收,开始帮助卫生部微生物研究所那边研究胰酶制取吧,若是做这个实验课题咱们可是有优势的,别忘了,咱们儿子在苏国留学过,也许他听说过一些关于胰酶制备的事情,要是能够制备成功,咱们也算有些贡献,往后和他们那边还能展开广泛的合作与交流呢1
“我也觉得咱们不能再在这个方子上浪费时间了,咱们和药物研究所里的那群人不一样,他们已经功成名就,就算是耗费十年八年研究不出来也没什么大不了的,可是咱们不一样啊,咱们要的是成果1许香开口迎合丈夫道:“我也赞成改变研究目标,咱们应该转变方向开始研究如何制备胰酶1
(本章完)', ')')